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探讨红外分光光度计的常用波长
时间:2019-03-01 点击次数:752
   探讨红外分光光度计的常用波长
  红外分光光度计厂家的分光光度计是利用分光光度法,通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析。不同种类的分光光度计的基本原理相似,都是利用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源。光源透过测试的样品后,部分光源被吸收,通过测量样品的吸光值,经过计算可以转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。
  红外分光光度计常见用途和波长有哪些?
  1.核酸定量
  核酸的高吸收峰的吸收波长260 nm。利用260nm的波长可以定量测量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA的浓度。
  除了核酸浓度,分光光度计同时显示几个非常重要的比值表示样品的纯度。如A260/A280的比值,用于评估样品的纯度,因为蛋白的吸收峰是280nm。纯净的样品,比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8或2.0,表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。
  A230表示样品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,苯酚等,较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0。
  A320检测溶液的混浊度和其他干扰因子。纯样品,A320一般是0。
  2.蛋白质直接定量
  这种方法是在280nm波长,直接测试蛋白。选择Warburg公式,光度计可以直接显示出样品的浓度,或者是选择相应的换算方法,将吸光值转换为样品浓度。
  3.细菌细胞密度
  细菌培养过程中,需要采用分光光度计准确测定细菌细胞密度。
  追踪液体培养物中微生物生长的标准方法在600nm波长下,以未加菌液的培养液作为空白液,测量定量培养后的含菌培养液。

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